质粒拯救（plasmid rescue）是遗传学中的一个专业术语，具体解释如下：
一、定义
质粒拯救是一种确定随机未知基因的方法，它利用质粒作为载体，通过酶切、插入、重组等步骤，最终获取目的基因的部分或全部序列。
二、原理
- 质粒准备：首先，选择一个含有调节元件（如35S启动子）的质粒。这个质粒将被用于后续的酶切和插入操作。
- 酶切与插入：将质粒进行酶切，然后插入到植物基因组中。这个过程是随机的，因此植物基因组中的某个基因可能会被质粒中的调节元件所调节，进而导致植物出现表型变化。
- 酶切与拯救：插入质粒的某个酶切位点（如Smal1）可能与被调节基因中的某个酶切位点相同。通过一种或多种酶切操作，可以将全部或部分该基因连同插入的质粒一起切下来。
- 扩增与测序：将切下的片段自连成环状，然后使用调节元件的引物进行扩增。这样，就可以得到目的基因的部分或全部序列。
三、应用
质粒拯救技术在生物化学与分子生物学领域有着广泛的应用，特别是在核酸与基因的研究中。它可以作为一种确定随机未知基因的有效方法，为基因功能研究和基因工程提供有力的支持。
四、历史与发展
质粒拯救技术由Perucho在1980年首创，并用该法克隆了鸡胸腺苷激酶基因。然而，随着功能基因组学时代的到来，质粒拯救技术已经不能够胜任高通量的要求，因此它通常只能作为其他分离方法无效时的一个补充手段。
综上所述，质粒拯救是一种重要的遗传学技术，它利用质粒作为载体，通过一系列操作步骤获取目的基因的部分或全部序列。虽然它在高通量研究方面存在局限性，但在特定的研究场景下仍然具有广泛的应用价值。
